Diseño de »primers«

La calidad de un ensayo molecular depende en gran medida del diseño óptimo del »primer«. El »primer« sirve como molécula iniciadora específica para la amplificación de una diana determinada. En los procedimientos moleculares convencionales, por lo general se aplican solamente 2 ”primers”, mientras que el ensayo OSNA utiliza 6 “primers” diferentes. Éstos han sido diseñados especialmente para impedir la amplificación de los pseudogenes de CK19 o de sus productos de transcripción, que podrían conducir a resultados falso-positivos.

Adicionalmente, se impide una amplificación no deseada de ADN genómico mediante la precipitación del ADN a valores bajos de pH durante la preparación de las muestras y con una temperatura de reacción isotérmica de 65°C.

En conjunto, todos estos factores conducen a un análisis muy específico y exacto de los ganglios linfáticos.