Bases metodológicas
del Cell Cycle Profiling

Partiendo de tan sólo una pequeña biopsia del tumor (≥27mm³) se prepara un lisado en el compartimento homogeneizador del equipo de cell cycle profiling . El lisado se divide, y una parte del lisado se transfiere a un dispositivo especial - un chip de proteínas llamado ImmobiChip - para la medición de la expresión de la proteína mediante la utilización de anticuerpos marcados con fluorescencia .
La segunda parte del lisado se aplica a microcolumnas cargadas con anticuerpo . Las CDK unidas a la resina de afinidad se lavan y se incuban con un sustrato específico para la enzima. Al fosforilar el sustrato con grupos fosfato marcados con fluorescencia y la aplicación del sustrato así marcado al ImmobiChip, se detectan los valores de actividad de las CDK .
Una software fácil de usar determina las actividades específicas a partir de los niveles de expresión y de actividad y normaliza estos valores utilizando corrección de fondo, controles y estándares.
El software proporcionará al médico, mediante la utilización de un algoritmo específico, un resultado para la clasificación del tumor como de alto riesgo, riesgo intermedio o bajo riesgo respecto al potencial de relapso del tumor, correspondiente a la respuesta o bien una no-respuesta esperadas frente a un determinado fármaco quimioterapéutico .

FLUJO DE TRABAJO DEL CELL CYCLE PROFILING